โครโมโซม หากจำเป็นต้องมีการวิเคราะห์รายละเอียด ของโครโมโซมบริเวณใดบริเวณหนึ่ง โครโมโซมที่มีการควบแน่นสูงที่ระยะเมตาเฟส วิธีการนี้เรียกว่าเมตาเฟสจะไม่เหมาะสำหรับการวิเคราะห์ เซลล์ต้องได้รับการแก้ไขที่ระยะก่อนเมตาเฟส เมื่อโครโมโซมถูกทำซ้ำแต่ยังไม่ควบแน่นเต็มที่ นี่คือระยะโปรเมทาเฟส แม้ว่าโครโมโซมที่ระยะโปรเมทาเฟสจะแยกได้ไม่ดี พวกมันยังยาวมาก และมีการทับซ้อนกัน ของโครโมโซมอีกอันจำนวนมากในการเตรียมการ

แต่ก็ยังสามารถหาบริเวณที่เหมาะสม สำหรับการวิเคราะห์ในแต่ละเซลล์ได้ วิธีนี้หรือแนวทางซึ่งตรงกันข้ามกับวิธีเมทาเฟส เรียกว่าโพรเมทาเฟสหรือวิธีของไซโตเจเนติกส์ ที่มีความละเอียดสูงสาระสำคัญ ของการปรับเปลี่ยนวิธีการคือการหยุดกระบวนการหมุนวน และการควบแน่นของโครโมโซมในการพยากรณ์ ด้วยความช่วยเหลือของยาที่นำเข้าสู่การเพาะเลี้ยงเซลล์ 2 ถึง 3 ชั่วโมงก่อนการตรึง เงื่อนไขต่อไปสำหรับการได้รับเพลตเมทาเฟส ที่ดีคือเซลล์ไฮโปโทนไลเซชัน

ไฮโปโทนิกช็อกโดยปกติจะใช้สารละลายแคลเซียมคลอไรด์ หรือโซเดียมซิเตรตแบบไฮโปโทนิก ในสารละลายไฮโปโทนิก เซลล์จะบวมเปลือกนิวเคลียสแตก พันธะระหว่างโครโมโซมแตก และโครโมโซมจะลอยอย่างอิสระในไซโตพลาสซึม การเพาะเลี้ยงเซลล์ การใช้โคลเซมิดและการทำให้ไฮโปโทไนเซชัน กลายเป็นเงื่อนไขภายใต้วิธีการสร้างเซลล์สืบพันธุ์สมัยใหม่ สารแขวนลอยของเซลล์ได้รับการแก้ไข ด้วยส่วนผสมของเมทานอลและกรดอะซิติก

จากนั้นสารแขวนลอย จะถูกหมุนเหวี่ยงและเปลี่ยนสารตรึง ส่วนผสมของเซลล์ที่มีสารตรึงสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิ +4 องศาเซลเซียสเป็นเวลาหลายสัปดาห์ เมื่อมีการใช้ระบบกันสะเทือนดังกล่าวกับสไลด์แก้วที่สะอาด แผ่นเมตาเฟสจะขยายออกและมีโครโมโซม ที่แยกจากกันอยู่ภายใน เมื่อสารตรึงแห้ง เซลล์จะยึดติดกับกระจกอย่างแน่นหนา วิธีการเตรียมการจากวัฒนธรรมของเซลล์เม็ดเลือดขาว ซึ่งมักใช้บ่อยที่สุดได้อธิบายไว้ข้างต้น เพื่อวัตถุประสงค์ในการวินิจฉัย

การเตรียมการสามารถเตรียมได้จากคอเรียน ไขกระดูก อัณฑะ การเพาะเลี้ยงไฟโบรบลาสต์ การเพาะเลี้ยง แอมนิโอไซต์ ขั้นตอนสำหรับแต่ละวัตถุแตกต่างจากที่อธิบายไว้ข้างต้น แต่หลักการทั่วไปยังคงอยู่ การสะสมของเมตาเฟส ภาวะขาดน้ำ การตรึง การหยดลงบนสไลด์แก้ว การเตรียมการย้อมสี วิธีการย้อมสีที่ใช้กันมากที่สุดตามแนวคิดของเกียมซา หรือการย้อมสีอย่างง่าย คำว่าการย้อมสีตามปกติเป็นเรื่องธรรมดา สีย้อม เกียมซาย้อมโครโมโซมทั้งหมดอย่างสม่ำเสมอ

ตลอดความยาวทั้งหมด ในเวลาเดียวกันเซนโทรเมียร์ ดาวเทียม บางครั้งใช้กับไส้หลอดดาวเทียมและข้อจำกัดรอง กลไกการผูกมัดของสีย้อม เกียมซากับโครโมโซมไม่ชัดเจน ไม่จำเพาะเจาะจงกับเบสไนโตรเจนใดๆใน DNA ด้วยการย้อมอย่างง่าย การระบุกลุ่มของโครโมโซมเท่านั้นจึงเป็นไปได้ ดังนั้น วิธีนี้จึงใช้สำหรับการกำหนดความผิดปกติของโครโมโซมเชิงตัวเลขโดยประมาณ ความผิดปกติของโครงสร้างโครโมโซม การหลุด การโยกย้าย

การผกผันที่ตรวจพบโดยการย้อมสีอย่างง่าย ควรระบุโดยใช้การย้อมสีที่แตกต่างกัน การย้อมอย่างง่ายใช้กันอย่างแพร่หลาย ในการศึกษาการกลายพันธุ์ของโครโมโซม โดยคำนึงถึงความผิดปกติของโครโมโซม เมื่อทำการทดสอบปัจจัยแวดล้อมสำหรับการก่อกลายพันธุ์ แสดงให้เห็นอย่างชัดเจนถึงความผิดปกติ ที่เกิดขึ้นภายใต้อิทธิพลของรังสี และสารก่อกลายพันธุ์ทางเคมี วิธีการย้อมโครโมโซมอย่างง่ายเป็นวิธีเดียวในการศึกษาโครโมโซมของมนุษย์

ซึ่งถูกนำมาใช้จนถึงต้นทศวรรษ 1970 ด้วยความช่วยเหลือของมันเป็นเวลากว่า 10 ปี การค้นพบโรคโครโมโซมหลัก บทบาทของความผิดปกติของโครโมโซมในการทำแท้งที่เกิดขึ้นเอง การผิดรูปแต่กำเนิดและการเกิดมะเร็งได้แสดงให้เห็น และหลักการของการวัดปริมาณรังสี ทางชีวภาพได้รับการพัฒนาขึ้น ความเป็นเนื้อเดียวกันทางสัณฐานวิทยาของโครโมโซม ในความยาวในการเตรียมแบบมาตรฐาน และการเตรียมแบบย้อมด้วยเกียมซานั้นทำให้เข้าใจผิด

ความก้าวหน้าของไซโตจีเนติกส์ของมนุษย์ ทำให้สามารถเปิดเผยความแตกต่างเชิงเส้นเชิงลึกได้ ไม่เพียงแต่หน้าที่เท่านั้นแต่ยังรวมถึงโครงสร้างด้วย รอบของโครโมโซมในช่วงทศวรรษที่ 70 วิธีการย้อมสีที่แตกต่างกันและลำดับเหตุการณ์ของการจำลองแบบของดีเอ็นเอ ในโครโมโซมได้เข้าสู่การปฏิบัติ ภายใต้การย้อมสีดิฟเฟอเรนเชียลของโครโมโซม เป็นที่เข้าใจกันว่าความสามารถในการย้อมสีแบบเลือกสรร ตามความยาวโดยไม่มีการดัดแปลงภายในโดยอิทธิพลใดๆ

การย้อมสีดิฟเฟอเรนเชียลของโครโมโซมนั้น มาจากผลกระทบของเกลืออุณหภูมิที่ค่อนข้างง่าย ต่อโครโมโซมคงที่ ในเวลาเดียวกัน ความแตกต่างทางโครงสร้างของโครโมโซม ตามความยาวจะถูกเปิดเผย ซึ่งแสดงออกในการสลับกันของภูมิภาคยู และเฮเทอโรโครมาติก แถบสีเข้มและแถบแสง ความยาวของส่วนเหล่านี้มีความเฉพาะเจาะจงสำหรับแต่ละโครโมโซม แขนและบริเวณที่สอดคล้องกัน ที่มีการย้อมสีแบบดิฟเฟอเรนเชียล

โครโมโซมและแม้แต่บางภูมิภาคทั้งหมดจะถูกระบุ โครโมโซมแต่ละตัวมีรูปแบบลายเส้นของตัวเอง ในขั้นต้นสารอะคริชินิไพร์ตถูกใช้สำหรับการย้อมสีพิเศษของโครโมโซม ตัวแปรนี้เรียกว่าวิธี Q ซึ่งต้องใช้การประมวลผลอย่างรวดเร็วของยา ซึ่งไม่สะดวกเสมอไป หากต้องการดูการจัดเตรียม คุณต้องใช้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง ต่อจากนั้นจึงได้พัฒนาเทคนิคการย้อมสีแบบดิฟเฟอเรนเชียล โดยไม่ใช้สีย้อมเรืองแสง ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายคือจีสเตนอ้างอิงจากเกียมซา

ซึ่งต้องเตรียมโครโมโซมก่อน บ่มในน้ำเกลือหรือน้ำย่อย การรักษาเบื้องต้นจะทำลายโครงสร้างของโครโมโซมบางส่วน ในบางพื้นที่จะมีการคืนค่าระหว่างการย้อมสี ซึ่งจะทำให้โครโมโซมแต่ละเส้นแยกส่วน กลไกการสร้างปล้องยังไม่ชัดเจนเพียงพอ สันนิษฐานว่าส่วนที่ย้อมสีเป็นเฮเทอโรโครมาติก ซึ่งเป็นบริเวณที่มีการจำลองแบบช่วงหลัง ของโครโมโซมที่มีลำดับดีเอ็นเอซ้ำๆ ในขณะที่ส่วนที่ไม่มีสีเป็นบริเวณที่มียูโครมาติก ซึ่งมีลำดับการเข้ารหัสอยู่

ในการระบุโครโมโซม นอกจากวิธีการตรวจหาความแตกต่าง ของโครงสร้างเชิงเส้นแล้ว ยังสามารถใช้ลักษณะสำคัญอย่างหนึ่งของโครโมโซมมนุษย์ได้ นั่นคือการจำลองแบบอะซิงโครนัส ตามความยาว ลำดับ ภาพวาด การจำลองแบบไม่ช้าก็เร็วจำลองภูมิภาค มีความเฉพาะเจาะจงสำหรับโครโมโซมแต่ละอัน เพื่อระบุลำดับการจำลองแบบจะใช้ไทมิดีนแอนะล็อก 5-โบรโมเดออกซียูริดีน โครโมโซม บางส่วนของโครโมโซมที่รวมอะนาล็อกนี้มีคราบสกปรกไม่ดี

เมื่อใช้วิธีนี้จะสามารถระบุการจัดเรียงใหม่ ของโครโมโซมหรือโครโมโซมได้ อะนาล็อกของ 5-โบรโมไดออกซียูริดีนถูกนำเข้าสู่วัฒนธรรมเป็นเวลา 24 ชั่วโมงหรือมากกว่านั้น สำหรับการย้อมสีที่แตกต่างกันของโครมาทิดน้องสาว หากนำ 5-โบรโมดีออกซียูริดีนมาใช้ในวัฏจักรเต็มเซลล์ โครมาทิดที่เกิดขึ้นใหม่จะรวมแอนะล็อกของไทมิดีน และจะเปื้อนอย่างอ่อน ส่วนโครมาทิดอีกอันเก่าจะเปื้อนอย่างเข้มข้นตามปกติ วิธีนี้ช่วยให้ตรวจหาการแลกเปลี่ยนระหว่างโครมาทิดพี่น้องกัน

ซึ่งจำนวนโครมาทิดที่เพิ่มขึ้น ในโรคทางพันธุกรรมที่มีความไม่แน่นอนของโครโมโซม โรคโลหิตจางแฟนโคนี เม็ดสีซีโรเดอร์มาจำนวนโครมาทิดน้องสาว ยังเพิ่มขึ้นภายใต้อิทธิพลของการกลายพันธุ์ ดังนั้น วิธีการบัญชีสำหรับโครมาทิดน้องสาว จึงถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวาง ในการศึกษากระบวนการกลายพันธุ์ในมนุษย์

บทความอื่นๆที่น่าสนใจ : cell อธิบายหลักการกำหนดประเภทของเซลล์ที่เกิดการกลายพันธุ์